1.1实验样品
养殖大黄鱼由福建省宁德市夏威水产食品有限公司提供。将刚捕获的大黄鱼冰水冻休克后，层冰层鱼装入塑料泡沫箱内，温度维持在0~1℃，冷藏车15 h内送达上海实验室。
1.2仪器与试剂
电子天平（上海精天电子仪器有限公司，JT12001），全自动立式压力蒸汽灭菌器（上海博讯实业有限公司医疗设备厂，YXQ-LS-50SII），高精度低温培养箱（Sanyo MIR 153，253，553，均由日本产），净化工作台（上海整新电子设备，SEX-TJ），高速组织捣碎机（上海精科实业有限公司，DS-1），恒温培养箱（Sanyo MIR 150，日本）。
铁琼脂培养基（上海中科昆虫生物技术开发有限公司按照Oxoid code CM 867配制），蛋白胨（国药集团化学试剂有限公司，BR），氯化钠（国药集团化学试剂有限公司，AR）。
1.3数据采集
选用规格基本一致的大黄鱼个体（质量300~400 g），分成4组。其中一组按层冰层鱼装入带有滴水孔的干净塑料泡沫箱中，控制贮藏温度（3±0.1）℃，适时加冰，即为0℃贮藏；另外3组分别放入下有篦子能沥水的塑料盆中，盖上有漏气孔的盖，分别控制贮藏温度在（3±0.1）℃，（7±0.1）℃和（10±0.1）℃，每隔适当时间对试样鱼进行感官质量评分和产H2S菌计数[12]。
为了验证和评价所建立模型的可靠性，另外进行（5±0.1）℃，（8±0.1）℃的大黄鱼贮藏实验。
1.4数学模型与模型验证
微生物生长动力学模型
将大黄鱼在0℃，3℃，7℃，10℃贮藏中得到的产H2S菌实验数据，分别采用Zwietering等修正的Gompertz方程描述不同温度下的生长动态。实验数据应用Statistica 6.0统计分析软件，选取适当的数学模型进行回归分析。预测模型准确性的评价将5℃和8℃条件下贮藏大黄鱼实验得到的货架期，与建立的大黄鱼货架期预测模型预测的5℃和8℃的货架期进行比较，用两者之间的相对误差表示，来验证和评价剩余货架期模型的准确性及可靠性。
2结果与分析
2.1不同温度贮藏大黄鱼的货架期分析
将大黄鱼在0℃，3℃，7℃，10℃贮藏过程中感官评分用多项式回归得到不同温度贮藏中大黄鱼的感官鲜度变化曲线。由大黄鱼在0℃，3℃，7℃，10℃贮藏中，出现明显臭味和异味即感官评分达到2时的货架期分别为523 h，368 h，197 h，150 h，结果显示不同贮藏温度对大黄鱼的鲜度变化影响很大。
2.2产H2S菌*小腐败菌数的确定
用修正的Gompertz方程回归得到大黄鱼在不同贮藏温度条件下产H2S菌的生长曲线。由图可见，用修正Gompertz方程均能适当地描述在0℃，3℃，7℃，10℃贮藏大黄鱼中产H2S菌生长动态典型的S型曲线，求得的相关系数值较高（R2分别为0.975，0.923，0.922，0.925）。0℃，3℃，7℃，10℃贮藏大黄鱼感官货架期终点的产H2S菌数对数值（lgCFU/g）分别为6.13，6.24，6.62，6.48，即*小腐败菌数（Ns）的平均值为（6.37±0.22）lgCFU/g.
2.3产H2S菌生长动力学参数
汇总了由Gompertz方程回归拟合求得的产H2S菌的生长动力学参数。由Gompertz方程回归得到的产H2S菌生长动力学模型的R2值均大于0.960，表明不同温度下产H2S菌的生长动力学模型拟合度较好，能准确可靠地预测大黄鱼不同贮藏温度条件下产H2S菌的生长动态。比较不同温度下产H2S菌的生长动力学参数可得，在0~10℃范围内，产H2S菌的*大菌数（Nmax）受温度的影响不是很明显，Nmax均值为（6.53±0.14）lg CFU/g；而*大比生长速率（μmax）和生长延滞期（λ）却有着显着的不同，即产H2S菌的λ随温度的升高而减短，而其μmax则增大。
产H2S菌生长动力学参数（*大比生长率，延滞时间，*大菌数和初始菌数）与鲤鱼货架期之间的相关系数。本研究中，产H2S菌的初始菌数（N0）比较一致，因此导致了与货架期之间的相关性不强，一般情况下，初始的微生物数量越低货架期比较长。与*大比生长率呈负相关，并且相关性*高（0.994），即*大比生长率越大，货架期越短；与延滞时间呈正相关，相关性次之（0.947），即延滞时间越长，货架期也越长；与*大菌数呈负相关，相关系数*低（0.641），与上述*大菌数受温度的影响不是很明显结果相一致。
2.4温度对产H2S菌生长动力学参数的影响
在大黄鱼的实际生产加工和贮藏销售过程中，冷藏链温度会经常在一定的范围内（0~10℃）变化。温度对微生物生长动力学的影响一般用平方根模型即Belehradek方程进行描述。
应用Gompertz方程求得的产H2S菌生长动力学参数建立温度与生长动力学参数的关系。图3是Belehradek方程描述的温度与产H2S菌的*大比生长速率（μmax）的关系，公式5是回归求得的平方根模型。该模型的R2值为0.959表明在0~10℃范围内，温度与maxμ有着良好的线性关系。
2.5大黄鱼剩余货架期预测模型
已求得在0℃，3℃，7℃，10℃四种温度下，大黄鱼货架期终点时的产H2S菌数即*小腐败水平（Ns）的平均值为（6.37±0.22）lgCFU/g.又因为在0~10℃范围内主要是产H2S菌的生长繁殖引起大黄鱼品质和鲜度的下降，根据本研究建立的产H2S菌生长动力学模型（公式7），可利用产H2S菌初始菌数（N0）到*小腐败水平菌数（Ns）所需的时间来预测0~10℃冷藏流通大黄鱼的剩余货架期（SL，h），从而建立了大黄鱼剩余货架期预测模型。
2.6剩余货架期预测模型验证与评价
将大黄鱼贮藏在5℃和8℃温度下的实际货架期与根据大黄鱼剩余货架期预测模型计算的货架期预测值进行比较，验证上述预测模型的准确性，结果以模型预测货架期和实测货架期的相对误差表示，如表3所示。从表3中数据可看出，大黄鱼在5℃和8℃贮藏的货架期的预测值和实测值的相对误差分别为-9.29%和-16.2%，预测结果和真实值之间能够较好地符合。由此可得，应用本研究建立的剩余货架期预测模型，能够较快速较准确地预测0~10℃范围内贮藏流通大黄鱼的鲜度品质和剩余货架期。